隨著科技的進(jìn)步,在傳統(tǒng)的病理技術(shù)作業(yè)上高科技應(yīng)用的方面越來(lái)越廣泛,像脫水、染色、特染、免疫組化這幾個(gè)方面各個(gè)廠(chǎng)家都推出了新機(jī)器來(lái)代替人工操作使得這些工作的效率和質(zhì)量得到大幅度的提高,現(xiàn)在國(guó)內(nèi)一些有實(shí)力的廠(chǎng)家也進(jìn)入這個(gè)領(lǐng)域,我們科去年年底購(gòu)入深圳達(dá)科為公司DP260型染色機(jī)用于病理技術(shù)工作里的常規(guī)HE染色,常規(guī)HE人工染色步驟多,隨意性強(qiáng),質(zhì)量不穩(wěn)定,而全自動(dòng)染色機(jī)正好避免了這些問(wèn)題,通過(guò)一段時(shí)間的使用,我們根據(jù)現(xiàn)有的工作環(huán)境和試劑情況,摸索和制定了新的染色流程和程序,并利用DP260染色機(jī)內(nèi)置的靈活、實(shí)用的功能設(shè)置,使得染色質(zhì)量和效率顯著改善?,F(xiàn)將我們使用的情況匯報(bào)如下:
我們使用的是達(dá)科為公司DP260型染色機(jī),試劑為改良邁耶蘇木素、1%醇溶性伊紅、80%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、無(wú)水乙醇、二甲苯、1%鹽酸乙醇、二甲苯。
方法:常規(guī)石蠟切片
HE染色,石蠟切片厚3微米,裱帖在載玻片上,在載玻片的磨砂面正確標(biāo)出組織塊的編號(hào),放入染色機(jī)配套的玻片籃中即可上機(jī)染色程序完成后自染色出口處取出切片,置入CV5030自動(dòng)蓋片機(jī)中,使用中性樹(shù)膠封固。程序如圖:
結(jié)果:石蠟切片HE染色透明性好、鮮艷、均勻胞核和胞質(zhì)著色良好、對(duì)比清晰。
討論
試劑選擇;北方地區(qū)冬天氣溫冷,水溫低,用一般染色機(jī)染色的話(huà)不易上色、顏色發(fā)灰,DP260自帶的加溫功能,它可以將四個(gè)站點(diǎn)通過(guò)水溫持續(xù)加熱并維持33到40度,而且水溫可調(diào)。我們?cè)谔K木素的選擇了邁耶蘇木素,主要是由于哈瑞氏蘇木素在加溫的條件下會(huì)容易過(guò)氧化,出渣以致染色質(zhì)量不穩(wěn)定和蘇木素的使用時(shí)間過(guò)短,而邁耶蘇木素屬于半氧化蘇木素可很好地避免這些問(wèn)題發(fā)生,它可以在加溫的環(huán)境下長(zhǎng)期使用而不會(huì)有沉渣出現(xiàn),染色質(zhì)量在相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間保持穩(wěn)定,返藍(lán)我們是用流水長(zhǎng)時(shí)間沖洗,雖然染色時(shí)間加長(zhǎng)但好處是顏色鮮艷,不易掉色。伊紅用的是醇溶性伊紅,因?yàn)榇既苄砸良t上色快,顏色鮮艷。
2.染色程序設(shè)定和試劑位置擺放;我們科室主要從事常規(guī)病理工作,染色機(jī)的工作就是HE染色。為了提高工作效率,我們利用DP260染色機(jī)可同時(shí)設(shè)置儲(chǔ)存多套染色程序的功能擺放兩套蘇木素,并根據(jù)他們的位置和在染色過(guò)程中耗費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)的環(huán)節(jié)我們分別設(shè)定了兩套HE染色程序在工作中同時(shí)進(jìn)行,使得染色速度比只有一套程序的要大大加快。
3.試劑更換;由于采用的是浸染式染色,每天各批次間切片染色質(zhì)量會(huì)呈漸近式下降,且各染色缸液體會(huì)有一定的揮發(fā)和混合,因此,必須嚴(yán)格執(zhí)行定期更換染液試劑以確保染色質(zhì)量。我們通過(guò)DP260具有的試劑質(zhì)控功能,設(shè)置試劑更換提醒、預(yù)提醒和強(qiáng)制更換功能,。從軟件上徹底解決這一問(wèn)題,將滯后性更換變成預(yù)警性提醒可有效保證所有試劑均可及時(shí)更換,并可追溯性試劑更換記錄以備以后查詢(xún),本科室采用的是數(shù)量和時(shí)間相結(jié)合的質(zhì)控模式,在數(shù)量上如果達(dá)到三千張切片或者時(shí)間達(dá)到兩周話(huà)更換一次,每天進(jìn)行質(zhì)控,如效果不佳則立即更換。
DP260染色機(jī)作為一個(gè)病理技術(shù)方面的新參與者。它在繼承全自動(dòng)染色機(jī)染色機(jī)的優(yōu)點(diǎn)同時(shí),又開(kāi)發(fā)出符合現(xiàn)實(shí)需要并具有時(shí)代新氣象的新功能。他的局域水溫加熱功能從根本上解決了北方冬天由于氣溫過(guò)低導(dǎo)致染色不良的現(xiàn)象,還有他的強(qiáng)大的軟件質(zhì)控功能可以大大方便技術(shù)員的試劑管理,保證病理切片通過(guò)高質(zhì)量的染色獲得滿(mǎn)意的效果。
作者:周志強(qiáng) 主管技師 qlbl2013@163.com 18560081182
作者單位 250012 濟(jì)南 齊魯醫(yī)院病理科(周志強(qiáng) 王妍)