血液系統(tǒng)領域轉(zhuǎn)染
干細胞領域轉(zhuǎn)染
各種細胞系轉(zhuǎn)染
原代細胞轉(zhuǎn)染
神經(jīng)、心血管研究領域轉(zhuǎn)染
聯(lián)系人:文女士
電話:0755-26410427
郵箱:equipment@dakewe.com
升級款細胞電轉(zhuǎn)儀LE+
產(chǎn)品基本信息:
品牌:Celetrix
型號:LE+
貨號:11-0105
特點:
1.界面簡潔、操作簡單,
2.可適配20ul、100ul、200ul電擊管;
3.新增細胞系模式和PBMC模式,使用更便捷;保留傳統(tǒng)模式(Legacy mode),用戶可以根據(jù)實驗自行設定電轉(zhuǎn)參數(shù),得到優(yōu)化的轉(zhuǎn)染效果;
4.新模式優(yōu)化大質(zhì)粒電轉(zhuǎn)的細胞存活率和轉(zhuǎn)染效率;
5.全新密封加壓型電擊管設計:均勻電場從管蓋到管底??沙惺茈娹D(zhuǎn)產(chǎn)生氣體之壓力,在電轉(zhuǎn)瞬間壓縮氣泡,保證電場均勻;
6.適用于原代細胞,包括T,B細胞和神經(jīng)細胞等。原代細胞質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化率為50-80%,mRNA或者Cas9蛋白做基因編輯電轉(zhuǎn)效率可達90%以上;
7.電脈沖參數(shù)設定方便,內(nèi)部電路反應迅速,設定完成即可啟動,瞬間完成電轉(zhuǎn)。
Celetrix獨特模式,簡化電轉(zhuǎn)參數(shù)
Celetrix獨特地把細胞電轉(zhuǎn)分為兩個模式:細胞系模式和PBMC模式。絕大多數(shù)細胞系,貼壁生長的原代細胞,以及血液干細胞、刺激生長的T細胞、B細胞、NK細胞等直徑較大,這類細胞電轉(zhuǎn)參數(shù)較為接近,在細胞系模式下微調(diào)電壓就可以電轉(zhuǎn)。PBMC(外周血單個核細胞)以及未刺激的T細胞、B細胞和NK細胞等直徑較小需要電壓較高,在PBMC模式下進行電壓微調(diào)即可。兩種模式下電轉(zhuǎn)液是通用的,用戶使用非常方便。
--------------------------------------------------------------關于Celetrix電轉(zhuǎn)儀系列-----------------------------------------------------------------
【原理】
Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)即第三代電轉(zhuǎn)全新加壓電轉(zhuǎn)染技術(shù),是通過對密封的電擊管進行加壓電擊,產(chǎn)生的瞬間電流把一端的細胞膜打開,幾十毫秒內(nèi)外源物質(zhì)(DNA,protein, etc.)進入細胞膜內(nèi),細胞膜再次瞬間關閉,最終使得外源物質(zhì)在細胞內(nèi)表達。
【技術(shù)對比】
1) 電擊管:兩端少量氣泡被壓縮,接近100%都是均勻有效區(qū),可能是最后一代電轉(zhuǎn)技術(shù)。
2) 電極杯:有三點缺陷:①液面翹角處相當于電阻并聯(lián),阻值變小,分到的電壓偏小,細胞不能電轉(zhuǎn)。 ②由于兩端總電壓相等,液面凹面下方分到的電壓增加導致此處細胞死亡。 ③下方液面電壓分配比較均勻,均勻有效區(qū)小。
3) 毛細管:有明顯的缺陷, ①區(qū)有效時,②區(qū)③區(qū)細胞無效;②區(qū)有效時,①區(qū)細胞死亡,③區(qū)無效。③區(qū)有效時,①區(qū)和②區(qū)細胞死亡。①②③區(qū)只能選一個最佳,不好兼顧。另外,毛細管沒有壓力,氣泡影響特別大,造成電弧、實驗失敗等。
【服務領域】
輕松電轉(zhuǎn)所有細胞系(貼壁與懸浮細胞)與原代真核細胞:
【應用領域】
1. 細胞免疫治療新時代
(1)PBMC使用普通GFP質(zhì)粒電轉(zhuǎn)結(jié)果與流式分析圖
普通GFP質(zhì)粒電轉(zhuǎn)24h后效率大于80%
(2)PBMC使用SB轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)表達CAR-T2A-GFP結(jié)果
PBMC電轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)座子14天后的CAR表達效率為65.9%,并且細胞狀態(tài)和未電轉(zhuǎn)的一樣穩(wěn)定快速聚集生長
(3)7天擴增的NK細胞電轉(zhuǎn)后第7天(總培養(yǎng)14天)CD56-PE染色分析
電轉(zhuǎn)GFP轉(zhuǎn)座子兩個質(zhì)粒7天后,細胞用CD56-PE染色分析;NK細胞比例大約有86%;其中GFP陽性的有68%,比第四天稍有下降
2.基因編輯
電轉(zhuǎn)Cas9和gRNA(+)或者Cas9蛋白,通過T7E1核酸內(nèi)切酶檢測基因編輯效率,在APP, AAVS1, OCT4和PDCD1四個基因位點的編輯效率均超過50%,其中AAVSl基因位點編輯效率能達到70%
3.抗體生產(chǎn)
CHO細胞電轉(zhuǎn)6kb小質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)效率>99%
普通質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)表達抗體
轉(zhuǎn)座子高效整合系統(tǒng)表達抗體
CHO細胞電轉(zhuǎn)11kb較大質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)效率>80%
GFP, mCherry代替HC,LC
含有GS篩選標記可做穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株
4.干細胞電轉(zhuǎn)
Human iPSC 高效電轉(zhuǎn)、保持未分化狀態(tài),可進行基因編輯
ACS-1030 transfection with GFP plasmid 72 hours(SBI, Coriell iPSC similar)
【電轉(zhuǎn)體系】
基礎款細胞電轉(zhuǎn)儀SP100:20ul、100ul兩個電轉(zhuǎn)體系;
升級款細胞電轉(zhuǎn)儀LE+:20ul,120ul,200ul三個電轉(zhuǎn)體系;
升級款細胞電轉(zhuǎn)儀EX+:可適配20ul、100ul、200ul、600ul、1ml電擊管;
大體積細胞電轉(zhuǎn)儀SLT:可適配200ul、1ml、5ml、10ml電擊管;
超高壓細菌、酵母電轉(zhuǎn)儀UHV:酵母電轉(zhuǎn)可適配20ul、100ul、200ul和1ml;細菌電轉(zhuǎn)可適配20ul,100ul,600ul;
細菌、酵母、細胞電轉(zhuǎn)一體機UHV-Plus:酵母電轉(zhuǎn)可適配20ul、100ul、200ul和1ml;細菌電轉(zhuǎn)可適配20ul,100ul,600ul;細胞電轉(zhuǎn)可適配20ul電擊管,細胞量0.5-3X10^6
【產(chǎn)品參數(shù)】